معرفی وسترن بلات
وسترن بلات یک روش برای تجسم پروتئین هایی است که با الکتروفورز ژل جداسازی شده اند. این ژل در کنار یک کاغذ نیتروسلولوز یا PVDF (پلی وینیل فلوراید) قرار دارد و جریان الکتریکی پروتئین ها را از ژل به غشا منتقل می کند. سپس غشا توسط آنتی بادی های اختصاصی برای پروتئین مورد بررسی هدف گیری شود و با استفاده از آنتی بادی های ثانویه و واکنش های رنگی مشخص شود.این روش در مقایسه با تست الیزا٬ اختصاصی‌تر است ولی از حساسیت کمتری برخوردار است و چون آزمایشی نسبتاً گرانی محسوب می‌شود٬ به عنوان اولین آزمایش انجام نمی‌گیرد و بیشتر در تأیید نتایج مثبت شده تست الیزا بکار می‌رود.تست وسترن بلات در همراهی با تست الیزا٬ بیش از ۹۹٪ مورد اطمینان خواهد بود. امروزه برای بسیاری از عفونت های ویروسی و باکتریایی تست تأیید وسترن بلات موجود است.
تکنیک وسترن بلات
هدف از این روش شناسایی اختصاصی پروتئین هاست، ابتدا پروتئین‌های تفکیک شده بر روی ژل الکتروفورز به غشاء منتقل می‌شود و سپس از پادتنها (آنتی بادی‌ها) برای مشخص کردن پروتئین‌ها استفاده می‌شود.
این روش آزمایشگاهی دارای ۳ مرحله است :
- جداسازی کل پروتئین‌ها بر اساس اندازه با استفاده از الکتروفورز پروتئین در ژل
- انتقال کافی پروتئین‌های جداشده به یک بستر جامد
- شناسایی اختصاصی پروتئین هدف با آنتی‌بادی مناسب.
هدف این آزمایشگاه با توجه به امکانات کافی جهت انجام وسترن بلات، کمک امور پایان نامه ها و طرح های اساتید و دانشجویان عزیز می باشد.